Janusas Greenas B, angliškas pavadinimas Janus Green, molekulinė formulė C30H31ClN6, CAS 2869-83-2, yra žalios spalvos kieti milteliai kambario temperatūroje ir slėgyje. Atrodo, kad jis tirpsta vandenyje, bet šiek tiek tirpsta alkoholio organiniuose tirpikliuose. Jis gerai tirpsta vandenyje, ypač ištirpęs karštame vandenyje ir atrodo mėlynas. Jis taip pat šiek tiek tirpsta alkoholio tirpikliuose. Ši savybė leidžia jam greitai išsklaidyti ir nusidažyti biologiniuose mėginiuose. Tai specifinis gyvo dažymo agentas, kuris gali būti naudojamas gyvam mitochondrijų dažymui, grybelių ir pirmuonių dažymui, embrionų pjūvių dažymui, taip pat redokso indikatoriams ir vario galvanizavimo priedams. Jis gerai pritaikomas pagrindinėse mokslinių tyrimų srityse, tokiose kaip biochemija ir fluorescenciniai dažai. Jo molekulinėje struktūroje yra azo dažų, todėl jis yra veiksmingas organinis dažiklis. Dėl teigiamo krūvio jo molekulinėje struktūroje jis taip pat turi tam tikrą panaudojimo vertę galvanizavimo medžiagose.
|
|
|
|
Cheminė formulė |
C30H31ClN6+ |
|
Tikslios Mišios |
510 |
|
Molekulinė masė |
511 |
|
m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
|
Elementų analizė |
C 70,51; H 6,11; N 16,44; Cl, 6,94 |
Janusas Greenas B, kaip svarbus biologinis dažiklis, turi platų pritaikymo spektrą keliose srityse.
1. Mitochondrijų dažymas in vivo
Labiausiai{0}}žinomas naudojimas yra mitochondrijai būdingas gyvas dažymas. Mitochondrijos yra „energijos gamyklos“ ląstelėse, atsakingos už energijos molekulių, tokių kaip ATP, gamybą, kad palaikytų ląstelių gyvybinę veiklą. Jis gali specialiai nudažyti mitochondrijas, todėl po didelės galios mikroskopu jos atrodo mėlynos{3}}žalios, o citoplazma yra beveik bespalvė. Ši dažymo charakteristika leidžia mokslininkams aiškiai stebėti mitochondrijų pasiskirstymą, morfologiją ir kiekį ląstelėse, o tai labai svarbu tiriant mitochondrijų funkciją, metabolizmą ir ryšį su ligomis.
2. Grybų ir pirmuonių dažymas
Be mitochondrijų dažymo, jis taip pat gali būti naudojamas grybams ir pirmuoniams dažyti. Grybai ir pirmuonys yra svarbūs biologinių ir medicininių tyrimų objektai, o jų morfologija, struktūra ir fiziologinės savybės yra labai svarbios norint suprasti gyvybės procesus ir ligų mechanizmus. Dėl dažymo savybių šiuos mažyčius organizmus lengviau stebėti ir identifikuoti mikroskopu, o tai suteikia tvirtą paramą susijusiems tyrimams.
3. Embriono pjūvio dažymas
Vystymosi biologijos ir embriologijos tyrimuose embriono pjūvio dažymas yra svarbi priemonė suprasti embriono vystymosi procesą ir struktūrinius pokyčius. Jis gali būti naudojamas embrionų skilteles dažyti, siekiant padėti tyrėjams stebėti ir analizuoti ląstelių audinio struktūrą ir embrionų morfologines charakteristikas įvairiuose vystymosi etapuose. Tai labai svarbu norint suprasti embriono vystymosi reguliavimo mechanizmus, genetinių ligų atsiradimą ir reprodukcinės sveikatos problemas.
4. Redokso indikatorius
Jis taip pat turi oksidacijos{0}}redukcijos indikatoriaus funkciją. Cheminėse reakcijose medžiagų oksidacijos ir redukcijos būsenas dažnai lydi spalvos pokyčiai. Esant skirtingoms redokso būsenoms, jis bus skirtingų spalvų, todėl gali būti naudojamas kaip redokso reakcijų indikatorius. Dėl šios savybės jis gali būti naudojamas tokiose srityse kaip cheminė analizė, aplinkos stebėjimas ir maisto pramonė.
Pradedant nuo 4-amino-N, N-dietilanilino arba p-fenilendiamino (sudėtyje yra N, N-dietilanilino), metileno violetinis 3RAX gaunamas ciklizuojant su anilinu, dalyvaujant oksidantui. Vėliau,Janusas Greenas Byra gaunamas diazotinimo ir sujungimo reakcijos būdu.
Pradinė medžiaga: darant prielaidą, kad kaip pagrindinę pradinę medžiagą naudojame 4-amino-N, N-dietilaniliną. P-fenilendiamino (kurio sudėtyje yra N, N-dietilanilino) atveju gali prireikti papildomų veiksmų norint atskirti arba susintetinti norimą N,N-dietilpakeistą p-fenilendiaminą, tačiau čia mes sutelkiame dėmesį į vienos pradinės medžiagos atvejį.
Tikslas: ciklizuoti 4-amino-N, N-dietilaniliną su anilinu arba kitais tinkamais junginiais, kad susidarytų benzoheterociklinė struktūra, panaši į metileno violetinę 3RAX. Pirma, 4-amino-N, N-dietilanilinas tam tikromis priemonėmis, pvz., acilinimu, kondensavimu ir kt., paverčiamas lengviau ciklizuojamu tarpiniu junginiu, o tada tarpinis produktas ciklizuojamas anilinu.
Reakcijos pavyzdys (ne tiesioginė, tik iliustracija):
Acilinimo reakcija (amido tarpinio junginio susidarymas): 4-amino-N, N-dietilanilinas reaguoja su acilchloridu arba anhidridu ir susidaro atitinkamas amidas.
4-amino-N,N-dietilanilinas+acilchloridas → amido tarpinis produktas+HCl
Žiedo reakcija (hipotezė): tarpinis amido produktas ciklizuojamas su anilinu katalizatoriaus ir (arba) šildymo sąlygomis.
Amido tarpinis produktas+anilinas → tarpinis produktas panašus į metileno violetinį 3RAX
Tikslas: užtikrinti, kad tarpiniame produkte būtų aromatinių pirminių aminų, skirtų vėlesnėms diazotinimo reakcijoms.
Reakcijos pavyzdys (jei tarpinis produktas jau yra aromatinis pirminis aminas, praleiskite šį veiksmą):
Jei tarpinis produktas nėra aromatinis pirminis aminas, jį gali tekti paversti pirminiu aromatiniu aminu redukuojant, hidrolizuojant ar atliekant kitas reakcijas.
Nepirminis aminas tarpinis produktas + reduktorius / hidrolizuojantis agentas → aromatinis pirminis aminas tarpinis produktas
Tikslas: Paversti aromatinių pirminių aminų tarpinius produktus į diazonio druskas.
Cheminė lygtis:
Aromatinis pirminis aminas tarpinis produktas+azoto rūgštis+rūgštis → diazonio druska+vanduo
Pastaba: Diazotizacijos reakcija paprastai atliekama žemoje temperatūroje (pvz., žemesnėje nei 0 laipsnių C) ir rūgštinėmis sąlygomis, kad būtų išvengta diazonio druskų skilimo.
Tikslas: sujungti diazonio druskas su tinkamais fenolio arba aromatiniais amino junginiais, kad susidarytų Jianna Green B.
Cheminė lygtis (pavyzdys): diazonio druskos+fenoliniai arba aromatiniai amino junginiai → C30H31ClN6+šalutiniai produktai{4}}
Pastaba: Sujungimo reakcijos paprastai atliekamos šarminėmis sąlygomis, kad būtų skatinamas sujungimo produktų susidarymas. Norint gauti tikslinį produktą, Jianna Green B, labai svarbu pasirinkti tinkamus fenolinius arba aromatinius aminų junginius.
Papildomi veiksmai: valymas ir tolesnis{0} apdorojimas
Tikslas: išskirti ir išvalyti Jianna Green B iš reakcijos mišinio.
Metodas: Tai gali apimti tokius metodus kaip ekstrahavimas tirpikliu, kristalizavimas, perkristalizavimas, chromatografinis atskyrimas (pvz., chromatografija kolonėlėje, plonasluoksnė chromatografija, HPLC ir kt.).
Dėmesio: norint gauti didelio{1}}grynumo tikslinius produktus, labai svarbūs gryninimo ir{0}pastovaus apdorojimo veiksmai. Laboratorijoje šiuos veiksmus gali tekti kartoti kelis kartus, kad būtų optimizuotas derlius ir grynumas.
Biologiniuose eksperimentuose,Janusas Greenas Byra plačiai naudojamas kaip dažniausiai naudojamas gyvas dažymo agentas, norint stebėti mitochondrijų morfologiją ir pasiskirstymą. Jo unikalios dažymo savybės leidžia aiškiai atskirti mitochondrijas po mikroskopu, todėl tai yra svarbi ląstelių biologijos tyrimų priemonė. Toliau bus paaiškinta, kaip paruošti 1 % kokybės Jianna Green B dažų tirpalo frakciją. Šis procesas apima ne tik tikslų cheminių reagentų svėrimą ir ištirpinimą, bet ir kruopštų veiksnių, tokių kaip temperatūra ir tirpiklio parinkimas, įvertinimą, siekiant užtikrinti, kad galutinis dažų tirpalas būtų stabilus ir veiksmingas.
|
|
|
|
|
Eksperimentinis paruošimas
Medžiagos ir reagentai
Jianna Green B milteliai: įsitikinkite, kad įsigytas Jianna Green B yra labai grynas ir be priemaišų, o tai yra pagrindas ruošiant aukštos{0}kokybės dažų tirpalus.
Fiziologinis fiziologinis tirpalas: fiziologinis fiziologinis tirpalas, taip pat žinomas kaip 0,9% natrio chlorido tirpalas, dažnai naudojamas kaip tirpiklis biologiniuose eksperimentuose, siekiant sumažinti ląstelių pažeidimą, nes jo osmosinis slėgis yra panašus į žmogaus ląstelių osmosinį slėgį. Šiame eksperimente fiziologinis druskos tirpalas buvo naudojamas kaip Jianna Green B tirpinimo terpė.
Matavimo cilindras: naudojamas tiksliai matuoti fiziologinį druskos tirpalą.
Stiklinė: naudojama Jianna Green B milteliams ištirpinti.
Magnetinė maišyklė (pasirinktinai): naudojama pagreitinti tirpimo procesą ir užtikrinti, kad milteliai tolygiai pasiskirstytų tirpiklyje.
Temperatūros matuoklis: naudojamas stebėti ir kontroliuoti temperatūrą tirpimo proceso metu.
Elektroninis svarstyklės: naudojamas tiksliai pasverti Jianna Green B miltelius.
Matavimo kolba (neprivaloma): jei reikia didesnio tikslumo, tūriui nustatyti galima naudoti matavimo kolbą. Tačiau taikant šį paprastą paruošimo būdą, stiklinė ir matavimo cilindras gali būti naudojami tiesiogiai.
Rudo stiklo butelis: naudojamas paruoštam Jianna Green B dažų tirpalui laikyti. Rudas buteliukas gali užkirsti kelią šviesos poveikiui dažų tirpalui ir išlaikyti jo stabilumą.
Saugumo apsauga
Dėvėkite laboratorinius chalatus: Saugokite drabužius nuo cheminio užteršimo.
Mūvėkite pirštines: Venkite tiesioginio odos sąlyčio su cheminiais reagentais.
Dėvėkite apsauginius akinius: kad tirpalas nepatektų į akis.
Darbas traukos gaubte: Užtikrinti oro cirkuliaciją laboratorijoje ir sumažinti kenksmingų dujų kaupimąsi.
Paruošimo žingsniai
Naudodami elektroninius svarstykles tiksliai pasverkite 0,5 g Jianna Green B miltelių. Atminkite, kad svarstykles prieš svėrimą reikia sukalibruoti, kad būtų užtikrintas tikslus svėrimas.
Atsargiai supilkite pasvertus Jianna Green B miltelius į švarią stiklinę, kad milteliai neskristų.
Naudodami graduotą cilindrą, tiksliai išmatuokite 50 ml fiziologinio tirpalo. Atkreipkite dėmesį, kad matavimo metu matavimo cilindras turi būti pastatytas ant stabilaus paviršiaus taip, kad matymo linija būtų žemiausiame skysčio lygio taške, kad būtų užtikrintas tikslus matavimas.
Lėtai supilkite išmatuotą fiziologinį tirpalą į stiklinę su Jianna Green B milteliais. Atkreipkite dėmesį, kad jis turi būti pilamas lėtai išilgai stiklinės sienelės, kad išvengtumėte skysčio purslų arba susidarytų daug putų.
Švelniai išmaišykite tirpalą stikline lazdele, kad ištirptų Jianna Green B milteliai. Jei sąlygos leidžia, norint pagerinti tirpimo efektyvumą, maišymui galima naudoti magnetinę maišyklę.
Maišymo metu atkreipkite dėmesį į tirpalo spalvos pasikeitimą. Kai Jianna Green B ištirpsta, tirpalas palaipsniui turi tapti tamsiai žalias arba mėlynas{1}}žalias.
Dėl riboto Jianna Green B tirpumo kambario temperatūroje, siekiant pagerinti tirpimo efektyvumą, stiklinė gali būti kaitinama vandens vonioje iki 30–40 laipsnių Celsijaus. Atminkite, kad kaitinant temperatūra neturi būti per aukšta, kad nepažeistumėte Jianna Green B cheminės struktūros arba pernelyg neišgaruotų tirpiklis.
Kaitinimo metu toliau maišykite tirpalą, kol Jianna Green B milteliai visiškai ištirps ir tirpalas taps vienodas ir skaidrus.
Ištirpinus patikrinkite tirpalo spalvą ir skaidrumą. Jei tirpale yra neištirpusių dalelių arba nelygios spalvos, maišymas arba tinkamas kaitinimas turi būti tęsiamas tol, kol problema bus išspręsta.
Jei reikia koreguoti tirpalo koncentraciją, fiziologinio fiziologinio tirpalo arba Jianna Green B miltelių kiekį galima atitinkamai padidinti arba sumažinti pagal faktinę situaciją. Bet taikant šį paruošimo metodą, mes tiksliai pasvėrėme reagentą pagal 1% masės dalį, todėl paprastai nereikia jokių papildomų koregavimų.
Paruoštą Jianna Green B dažų tirpalą supilkite į rudo stiklo butelį ir sandariai uždarykite, kad neužterštumėte ir neišgaruotų.
Ant buteliuko pažymėkite dažų tirpalo pavadinimą, koncentraciją, paruošimo datą ir vartotojo vardą, kad galėtumėte naudoti ir tvarkyti ateityje.
Atsargumo priemonės
Tikslus svėrimas:
Norint paruošti aukštos -kokybiškus dažų tirpalus, būtina užtikrinti tikslų sveikų žaliųjų B miltelių ir fiziologinio fiziologinio tirpalo matavimą.
01
Temperatūros valdymas:
Šildymo proceso metu temperatūra turi būti griežtai kontroliuojama, kad būtų išvengta neigiamo poveikio dažų tirpalo kokybei dėl pernelyg aukštos arba žemos temperatūros.
02
Tinkamas maišymas:
Maišymas yra pagrindinis žingsnis siekiant užtikrinti, kad žalieji B milteliai būtų tolygiai ištirpinti fiziologiniame fiziologiniame tirpale, ir jį reikia tęsti tol, kol tirpalas taps vienodas ir skaidrus.
03
Saugus veikimas:
Griežtai laikykitės laboratorijos saugos taisyklių viso paruošimo proceso metu, kad užtikrintumėte asmens saugumą ir eksperimentinės aplinkos saugumą.
04
Naudojimas laiku:
Ilgai laikant paruoštą dažų tirpalą, vis tiek gali susilpnėti jo dažymo efektas arba sumažėti kiti cheminiai pokyčiai. Norint užtikrinti geriausią dažymo efektą, rekomenduojama jį naudoti kuo greičiau po paruošimo.
05
DUK
1. Kas yra Janus Green B?
Janus Green B yra dirbtinai susintetintas bazinis fenazino{0}}dažiklis, kuris dažniausiai naudojamas biologiniam dažymui (pvz., gyvam mitochondrijų dažymui) ir kaip oksidacijos-redukcijos indikatorius.
2. Kokie pagrindiniai tikslai?
Daugiausia naudojamas biologiniams eksperimentams:
- Gyvas mitochondrijų dažymas (kadangi mitochondrijų vidinės membranos sistema gali atkurti bespalvę būseną, atskleisdama redoksinį aktyvumą).
- Ląstelių kvėpavimo aptikimas (kaip oksidacijos-redukcijos indikatorius, mėlyna rodo oksidacijos būseną, o bespalvė – sumažintą būseną).
- Jis taip pat gali būti naudojamas kaip šilko ir odos dažiklis pramonėje.
3. Koks yra dažymo principas?
Mitochondrijose Janus Green B yra redukuojamas į bespalvį produktą, veikiant vidinės membranos fermentams (pvz., citochromo c oksidazei) mitochondrijų viduje; išėjus iš mitochondrijų, deguonis iš naujo{0}}oksiduojamas į mėlyną spalvą. Ši grįžtama redokso reakcija leidžia konkrečiai nurodyti mitochondrijų aktyvumą.
4. Į ką reikia atkreipti dėmesį naudojant?
- Reikia kontroliuoti dažų koncentraciją ir laiką (paprastai 0,01–0,02 %), kad būtų išvengta per didelio dažymosi, galinčio trukdyti ląstelių veiklai.
- Kai kurių tipų ląstelių dažymo efektas gali būti nepatenkinamas. Sąlygas reikia optimizuoti.
- Laikyti tamsioje ir sandarioje talpykloje, kad nesuirtų.
Populiarus Žymos: janus green b cas 2869-83-2, tiekėjai, gamintojai, gamykla, didmeninė prekyba, pirkti, kaina, urmu, parduoti