Fluoresceino izotiocianatas CAS 27072-45-3

Fluoresceino izotiocianatasOranžinė raudona, izotiocianatas fluorescencinė geltona, izotiocianato fluorescencinė raudona, izotiocianato fluoresceino izomeras i, 5- izotiocianatas fluorescei Pririšimas nepraranda jungimosi specifiškumo su tam tikru antigenu .. Jis vis dar turi stiprią žalią fluorescenciją šarminiame tirpale {., pridedant rūgšties, jis nusėda, o fluorescencija dingsta .}. Medicininis diagnostinis vaistas, kuris gali greitai diagnozuoti ligas, kurias sukelia bakterijos, virusai, parazitai ir kt. ., Be to, jis gali jungtis su įvairiais antikūnų baltymais, o antikūnai po jungimosi nepraranda rišimo, pridedant tam tikrą antigeną. dingsta, ir jis šiek tiek tirpsta acetone, eterio ir naftos eteryje .

Tyrimas apie savybiųFluoresceino izotiocianatasPažymėtas aminuotos želatinos insulinas ir jo taikymas nosies gleivinės administravimui:

Under the condition of no external emulsifier, the aqueous solution of aminated gelatin was dispersed in olive oil, and a new type of positively charged gel microspheres, aminated gelatin microspheres, was prepared through the processes of emulsification, gelling, dehydration and cross-linking. The average particle size of microspheres is 40-50 μ M . Dydis yra tolygiai paskirstytas . Džiovintos mikrosferos gali absorbuoti maždaug 20 kartų savo svorio vandens, kad susidarytų hidrogeliai . aminotinų mikrosferos, kurių amino yra aukštesnis nei židinio mikrosferos {.. Potencialas distiliuotame vandenyje yra 41 . 5 mV.

Padidėjus gliutaraldehido koncentracijai arba prailginant kryžminio ryšio reakcijos laiką, mikrosferų amino kiekis sumažėjo ., tačiau, neatsižvelgiant į kryžminimo reakcijos sąlygas, aminuotasis želatinos mikrosferos, paruoštos šiuo metodu, turi didesnį pirminio amino kiekį nei želatinos mikrosferos ({1}} aminotarino mikrosferos (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20h) Pepsino ir rūgšties-bazės terpėje . sąveika tarp aminuotų želatinos mikrosferų ir mucino yra stipresnė nei tarp želatinos mikrosferų . aukšto teigiamo krūvio tankio aminato gelatinos mikrosferos savybės yra stiprios jos stiprios sąveikos su MUCIN sąveika {{4} biologinėmis biologinėmis savybėmis, kurios yra stiprios jos stiprios sąveikos su mucin {{4} biozijos savybės, susijusios su stipria jo sąveika su mucin {{4} biozijos biologinėmis savybėmis. Mikrosferos buvo tiriamos naudojant fluorescencijos žymėjimo metodą ir in vitro fermentų skilimo technologiją, naudojant izoliuotą žiurkių skrandžio perfuzijos plovimo modelį ir in vivo eksperimentą žiurkėms .

Rezultatai parodė, kad esant toms pačioms eksperimentinėms sąlygoms, izoliuotame žiurkės skrandyje sulaikytos amato želatinos mikrosferų skaičius buvo daugiau nei želatinos mikrosferos, o drėkinimo tirpalo tipas (dirbtinės skrandžio sultys ar PH7 žmogaus fosfato buferis) neturėjo reikšmingos įtakos virpesių, o ne elektrosphero sąveikos), o ne gastrorinis, o ne elektrosphero sąveika tarp mikroferos, o tai rodo, kad elektrostatizato sąveika tarp mikroferos, o neliko mikroferos, o tai parodė, kad elektrostatizato sąveika tarp mikrosferos, o ne. Remiantis skrandžio mikrosferų sulaikymo šiame modelyje veiksnys ., tačiau eksperimente nustatyta, kad aminuotos želatinos mikrosferos, sulaikytos izoliuotame žiurkės skrandyje, kiekis sumažėjo, kai padidėjo kryžminio agento glutaraldehido koncentracija. gali turėti įtakos amino kiekis mikrosferų paviršiuje arba kryžminio sujungimo laipsnis .

Eksperimentiniai žiurkių in vivo rezultatai parodė, kad amino želatinos mikrosferos turėjo geresnį gleivinės adheziją nei želatinos mikrosferos . aminuotos želatinos poveikis nosies absorbcijai ir gliukano absorbcijai ir insulinui buvo tiriama sveikų žiurkių . rezultatams. Žiurbių nosies gleivinės, kurių biologinis prieinamumas yra 23 . 8%, žymiai skatina fluoresceino izoticianato gliukano absorbciją. Po intranazalinio 10 IU insulino fosfato buferio, kuriame yra 0 2% (m/v) amino želatinos, gliukozės kiekis kraujyje buvo žymiai mažesnis nei insulino fosfato buferio.

Fluoresceino izotiocianatas(FITC), kaip klasikinis fluorescencinis etiketės reagentas, tapo nepakeičiama priemonė biologijos, medicinos ir medžiagų mokslo srityse dėl didelio kvantinio derliaus, puikaus fotostoilumo ir gero biologinio suderinamumo .

Biomolekuliniai žymekliai: tikslus baltymų sekimas iki nukleorūgščių

 

FITC isotiocianato grupė (-N{1}C{2}S) gali reaguoti su aktyviomis grupėmis, tokiomis kaip aminų ir tiolų grupės biomolekulėse, formuodama stabilias fluorescencines žymėjimo kompleksus. Ši savybė daro ją pageidautinu reagentu baltymų, nukleorūgščių ir peptidų žymėjimui.
Baltymų ženklinimas ir funkciniai tyrimai
FITC pasiekia specifinį žymėjimą, jungdamas prie lyzino likučių baltymuose, tokių kai antikūnai ir lektinai {0} . Pavyzdžiui, imunofluorescencijos eksperimentuose, FITC žymėti antikūnai gali jungtis prie ląstelių paviršiaus antigenų ir kvantifikuoti analizuoti antigeno ekspresijos lygius per fluorescencinę mikroskopiją arba pratekėjimo citometriją {1} . Eksperimentiniai duomenys rodo, kad FITC IgG konjugato fluorescencijos intensyvumas yra tiesiškai susijęs su antigeno konsentracija, o jautrumo aptikimas gali siekiti Danak lygį {2} . Be to, FITC žymėti baltymai taip pats gali būti naudojami baltymų interakcijos studijoms, pvz., analizuoti baltymų konformacinius pokyčius naudojant fluorescencijos didelės energijos perduodamumo (FRET) technologiją {3}.

 

Nukleorūgšties žymėjimas ir molekulinė hibridizacija
FITC can be chemically modified to label the 5 'or 3' end of nucleic acids for fluorescence in situ hybridization (FISH) technology. In cancer research, FITC labeled probes can specifically bind to chromosomal abnormal regions to assist in the diagnosis of hematological diseases such as leukemia and lymphoma. For example, FITC probes targeting BCR-ABL sintezės genai gali parodyti geltonus fluorescencinius signalus tarpfazių ląstelių branduolyje, kurio tikslumo greitis yra didesnis nei 95%.
Peptidų žymėjimas ir vaistų pristatymas
FITC pažymėti peptidai vaidina svarbų vaidmenį narkotikų pristatymo sistemose ., vartojant M2PEP-FITC kaip pavyzdį, šią molekulę sudaro tikslinio peptido M2PEP ir FITC fluorescencinės grupės, kuri gali parodyti, kad Naviko ląstelių paviršiaus receptoriai ir pasiekia tikslinį narkotikų pristatymą . eksperimentuose. Audiniai yra 3 . 2 kartus didesnė nei laisvųjų vaistų, žymiai pagerinant terapinį efektyvumą ir sumažinant šalutinį poveikį.

Medicininė diagnozė: nuo patogeno nustatymo iki ankstyvos navikų patikrinimo

 

FITC fluorescencinės savybės daro ją „aukso standartu“ in vitro diagnostikos srityje, plačiai naudojama tokiose metoduose kaip imunochromatografija, srauto citometrija ir ELISA .
Greitas patogenų aptikimas
FITC pažymėti antikūnai gali būti naudojami greitai diagnozuoti bakterines, virusines ir parazitines infekcijas ., pavyzdžiui, maliarijos diagnozėje, FITC pažymėti anti -maliarijos antikūnai jungiasi prie paciento kraujo tepinulio, o žalio fluorescencijos signalas yra nustatytas pagal Fluorescopy Microscopy {}. Iki 15 minučių, o jautrumas siekia 98%., be to, FITC pažymėti nukleorūgšties zondai taip pat gali būti naudojami aptikti kvėpavimo takų viruso nukleorūgštį, tokias kaip SARS-COV ORF1AB genas -2, kurio specifika 99. 2%.

 

Naviko žymekliai
Srauto citometrijoje,Fuoresceino izotiocianatasPažymėti anti-CD45 antikūnai gali atskirti leukemijos ląsteles nuo normalių kraujo ląstelių .. Duomenys rodo, kad FITC teigiamas CD34 antikūno greitis diagnozuojant ūminę mieloidinę leukemiją (AML), yra 85%, tai yra 20% didesnis nei tradicinis morfologinis tyrimas}}}} ankstyvos ekrano sąlygomis, o tai yra 85%. (CTC) Aptikimo technologija gali užfiksuoti naviko ląsteles, esant ypač mažoms koncentracijoms periferiniame kraujyje, suteikdama naują metodą ankstyvai diagnozuoti solidus navikus, tokius kaip krūties vėžys ir plaučių vėžys .
Autoimuninių ligų diagnozė
ELISA technologijoje gali būti naudojami FITC pažymėti autoantikūnai (pvz., Anti branduoliniai antikūnai ir anti-dvigubai įstrigę DNR antikūnai), kad diagnozuotų ligas, tokias kaip sisteminė vilkligės eritemata (SLE) .} eksperimentai, parodė, kad FITC-ELISA jautrumas yra 92%, o specifiniai 95%, o specifiniai 95%-95%. Antikūnai, kurie yra žymiai geresni nei tradiciniai imunofluorescencijos metodai .

Ląstelių biologijos tyrimas: nuo tarpląstelinės struktūros iki dinaminio sekimo

 

Ląstelių pralaidumas ir žemas FITC toksiškumas daro jį idealiu įrankiu ląstelių vaizdavimui, plačiai naudojamam organelių lokalizavimui, ląstelių dalijimosi stebėjimui ir apoptozės tyrimams .
Ląstelių organelių žymėjimas ir dinaminis stebėjimas
FITC labeled mitochondrial probes (such as MitoTracker Green) can specifically bind to mitochondrial membrane potential and monitor mitochondrial morphological changes in real-time. In neuronal research, FITC labeled microtubule protein antibodies can display the dynamic extension of axon growth cones, revealing the mechanism of neural development. In addition, FITC pažymėti lizosomų zondai („Lysotracker Green“) taip pat gali būti naudojami tiriant autofagijos procesus, kiekybiškai įvertinant autofagosomų skaičių keičiant fluorescencijos intensyvumą .

 

Ląstelių ciklas ir apoptozės analizė
Srauto citometrijoje FITC pažymėtas propidium jodidas (PI) gali jungtis su DNR ir atskirti skirtingas ląstelių ciklo stadijas (G 0/G1, S, G2/M), naudojant fluorescencijos intensyvumą . eksperimentiniais duomenimis, kurių jautrumas yra 30 proc. Trypano mėlynos spalvos dažymo metodas . Be to, FITC pažymėti aneksino V zondai gali specifiškai jungitis su fosfatidilserinu, paveiktu ant apoptozinių ląstelių paviršiaus, tiksliai nustatyti ankstyvųjų apoptozinių ląstelių . identifikavimą
Ląstelių migracijos ir invazijos tyrimai
Transwell eksperimentuose FITC žymėti ląstelės gali stebėti migracijos procesą realiu laiku. Pavyzdžiui, tyrinėjant naviko metastazes, FITC žymėtų krūties vėžio ląstelių (MCF) migracijos greitis per matricą yra teigiamai koreliuojamas su invazijos gebėjimu, suteikiant kiekybinius rodiklius priešnavikinių vaistų atrankai.

Narkotikų kūrimas: nuo tikslinio patvirtinimo iki veiksmingumo įvertinimo

 

FITC vaidina daugybę vaidmenų kuriant vaistus, įskaitant tikslinį patvirtinimą, vaistų pristatymo sistemos vertinimą ir farmakokinetinius tyrimus .
Tikslo patvirtinimas ir veiksmų tyrimų mechanizmas
FITC labeled small molecule inhibitors can be used to validate drug targets. For example, FITC labeled EGFR inhibitors (such as gefitinib) can demonstrate the binding of drugs to EGFR receptors on the surface of tumor cells, quantifying the binding affinity (Kd value) through fluorescence intensity. In addition, FITC labeled siRNA can also be Naudojamas tiriant genų nutildymo efektyvumą, suteikiant pagrindą RNR trukdžių terapijai .

Narkotikų pristatymo sistemos vertinimas
FITC pažymėtos nanodalelės (tokios kaip liposomos ir polimerų mikrosferos) gali stebėti vaistų pasiskirstymą ir išsiskyrimą in vivo realiuoju laiku .

 

Eksperimentai parodė, kad FITC pažymėtų PEGilintų liposomų kaupimasis naviko audiniuose yra 2 . 8 kartus didesnė nei laisvų vaistų, o fluorescencijos signalas gali trukti 24 valandas, teikiant vaizdinius duomenis vaistų tiekimo sistemoms optimizuoti.

Farmakokinetiniai ir toksikologiniai tyrimai
FITC pažymėtos vaistų molekulės gali būti kiekybiškai analizuojamos, atsižvelgiant į jų absorbciją, pasiskirstymą, metabolizmą ir išsiskyrimą (ADME) procesus in vivo per fluorescencinį vaizdavimo technologiją . Dozavimas . Be to, FITC pažymėti citotoksiškumo tyrimai taip pat gali įvertinti vaistų pažeidimus normalioms ląstelėms ir nukreipti saugos vertinimus .

Medžiagų mokslas: nuo jutiklių iki fluorescencinių zondų

 

Dėl FITC fluorescencinio atsako charakteristikos jis yra vienareikšmiškai pritaikomas medžiagų mokslo srityje, įskaitant pH jutiklių, temperatūros jutiklių ir metalo jonų zondų . kūrimą
PH reaguojantis fluorescencijos jutiklis
Fluorescencijos intensyvumasFluoresceino izotiocianatas is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8 . 0), fluorescencija yra užgesinta . Remiantis šia savybe, FITC modifikuotos nanodalelės gali būti naudojamos stebint vidinių ląstelių rūgšties-bazės svyravimus ., pavyzdžiui, „New Metode“, pateikiant FITC biliribino kompleksą „Tumor Microwronment“, yra 2,3 karto, kai fluorescencinio tipo padegimo kompleksas yra nustatytas. diagnozė.

 

Temperatūra reaguoja į fluorescencinį zondą
FITC Fluorescencinis eksploatavimo laikas keičiasi esant temperatūrai . žemos temperatūros sąlygomis (4 laipsniai), FITC pažymėtų polimerų mikrosferų fluorescencinis eksploatavimo laikas yra išplėstas iki 5 . 2 nanosekundžių, tai yra 1 . 8 kartus aukštesnė nei kambario temperatūra). Ši savybė daro jį idealiu įrankiu tiriant fazių perėjimo procesus ir ląstelių krioprezervaciją.
Metalo jonų aptikimo zondas
FITC žymiai sumažina fluorescencijos intensyvumą, kai jis derinamas su metalo jonais, tokiais kaip Cu ² ⁺ ir Hg ² ⁺, todėl jis yra tinkamas aplinkos stebėjimui ., pavyzdžiui, FITC modifikuotų silikagelio nanodalelių nanodalelėse yra 0 . 1 nm hg ² ⁺ ⁺ vandenyje.

Žemės ūkis ir gyvuliai: nuo patogeno aptikimo iki įvairovės pagerėjimo

 

FITC taikymas žemės ūkio srityje pamažu plečiasi, įskaitant augalų viruso aptikimą, gyvūnų ligos diagnozę ir įvairovės grynumo identifikavimą .
Greitas augalų virusų nustatymas
Tabako mozaikos viruso (TMV), agurko mozaikos viruso (CMV) ir kitų virusų . eksperimentų aptikti FITC pažymėti viruso antikūnai gali būti naudojami aptikti tabako mozaikos virusą (TMV). Metodai . Be to, FITC pažymėti nukleorūgščių zondai taip pat gali būti naudojami norint nustatyti egzogeninius genus genetiškai modifikuotuose augaluose, tokiuose kaip vabzdžiams atsparūs BT genai.

Gyvūnų ligų diagnozė
FITC pažymėti antikūnai gali būti naudojami aptikti kiaulių karščiavimo virusą (CSFV), paukščių gripo virusą (AIV) ir kitus virusus .

 

Diagnozuojant kiaulių karščiavimą, FITC pažymėti anti CSFV antikūnai jungiasi prie audinių sekcijų ir stebėkite viruso pasiskirstymą atliekant fluorescinę mikroskopiją, sutrumpindami aptikimo laiką nuo tradicinių metodų 3 dienas iki 6 val.
Įvairaus grynumo identifikavimas
FITC labeled DNA probes can be used to identify the purity of crop varieties. For example, the FITC probe targeting the rice blast disease resistance gene Pi ta can accurately distinguish between homozygotes and heterozygotes in hybrid rice seeds, with a purity identification accuracy of 99.5%. In Be to, FITC pažymėti SSR molekuliniai žymenys taip pat gali būti naudojami gyvulininkystės ir paukštininkystės veislių genetinės įvairovės analizei, teikiant mokslinį veisimo pagrindą.

Synthesis of FITC: 4-nitrophthalic anhydride (see C8H3NO5, [5466-84-2]) reacts with resorcinol at 195-200℃C for 10h, cyclizes into a mixture of 3 'nitrofluorescein and 4' - nitrofluorescein, acetylates with acetic Anhidridas, hidrolizės su prisotintu natrio hidroksido etanolio tirpalu, 4 "nitrofluoresceinas gaunamas {., tada 4 ' - nitrofluoresceinas ištirpinamas amoniako vandenyje, o į 4' - ambinantą ir hidrazino hidratą 2H temperatūroje, o 2H - ambino, ambino, ambino, ambino, ambino, ambino, ambino, ambino, ambino, ambino, and omino, ambino ir hidrazino hidratą 2H hidratėje 2h, o 2h - ambinantai and omino Fluoresceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceiceice ū. Labiausiai radikali yra acilinta ir pašalinta norint gautiFluoresceino izotiocianatas.

„FITC Pure“ produktas yra geltoni arba oranžiniai kristaliniai milteliai, kurie lengvai tirpsta vandens ir alkoholio tirpiklyje .. Yra du izomerai, tarp kurių I tipo izomeras yra geresnis efektyvumo, stabilumo ir baltymų surišimo .. Bangos ilgis yra 520 ~ 530 nm, rodantis ryškiai geltoną žalią fluorescenciją . FITC daugelį metų galima laikyti šaltomis, tamsiomis ir sausomis vietomis. Tai yra plačiausiai naudojamas fluoresceino ..

Populiarus Žymos: Fluoresceino izotiocianatas CAS 27072-45-3, tiekėjai, gamintojai, gamykla, didmeninė prekyba, pirkimas, kaina, biria, parduodama