Epitalonas(nuoroda: https://www.bloomtechz.com/sintetinis-cheminis/peptidas/epitalon-milteliai-cas-307297-39-8.html) yra peptidinė molekulė, kuri, kaip manoma, turi gerą biologinį aktyvumą ir galimą gydomąją vertę. Šiuo metu epitalono peptidų tyrimai daugiausia orientuoti į jo kaip anti-senėjimo agento taikymą.
Epitalonas gali pailginti telomerų ilgį chromosomų galuose, aktyvindamas telomerazę, taip teigiamai veikiant kamieninių ląstelių dauginimąsi ir regeneraciją. Tyrimai parodė, kad Epitalon gali žymiai slopinti žalingą oksidacinį stresą, sumažinti DNR pažeidimus ir reguliuoti į insuliną panašaus augimo faktoriaus -1 (IGF-1) ekspresiją ir galiausiai pasiekti greitį sumažinant senėjimas ir gyvenimo trukmės pailgėjimas.
Be to, Epitalon taip pat turi imunomoduliacinį ir neuroprotekcinį poveikį. Epitalon gali sustiprinti žmogaus imunitetą ir paskatinti organizmą atpažinti ir pašalinti heterogeninius ir savaiminius antigenus. Be to, Epitalon taip pat gali sumažinti neuronų ląstelių mirtį ir neurodegeneraciją, taip pasiekdamas neuroprotekcinį poveikį. Epitalon taip pat turi priešvėžinį poveikį ir daro savo poveikį reguliuodamas ląstelių ciklą, skatindamas ląstelių apoptozę ir slopindamas naviko ląstelių dauginimąsi.
|
|
|
Epitalon yra kūno stipriklis, polipeptidinis junginys, sudarytas iš keturių aminorūgščių alanino (Ala), glutamo rūgšties (Glu), asparagino (Asp) ir lizino (Lys). Epitalon sintezės metodai daugiausia skirstomi į cheminę sintezę ir biosintezę.
Cheminės sintezės metodas:
Epitalon yra peptidas, sudarytas iš keturių aminorūgščių, kurių molekulinė formulė C14H22N4O9. Epitalon gali skatinti žmogaus augimo hormono išsiskyrimą ir taip padėti sulėtinti senėjimą, pagerinti miegą ir sustiprinti imunitetą.
1. Reagento paruošimas:
Reagentai Epitalon sintezei apima keturias aminorūgštis, alaniną (Ala), glutamo rūgštį (Glu), asparaginą (Asp) ir liziną (Lys), taip pat acilinimo reagentus, tokius kaip Boc-Lys-OtBu ir Asp (OtBu). 2 ir pan. Šių aminorūgščių ir reagentų grynumas turi būti didesnis nei 99 proc., antraip bus paveikta produkto kokybė.
2. Cheminės sintezės etapai
2.1 Alanino -4-hidroksisviesto rūgšties anhidrido (Ala-Hyp) sintezė:
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95 procentų grynumas.
2.2 Ala-Hyp-Glu-OtBu sintezė:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 proc
2.3 Epitalono sintezė:
Į kondensacijos reakcijos sistemą įpilkite Asp(OtBu)2 ir Boc-Lys-OtBu iš anksto numatyta tvarka ir atlikite kelias kondensacijos reakcijas, kad gautumėte Epitalon. Procesas yra toks:
a. Apsaugos grupės reakcija:
Pirma, Asp (OtBu) 2 buvo pašalintas, o apsauginė Asp (OtBu) 2 grupė buvo pašalinta naudojant natrio hidroksidą (NaOH) ir trichloracto rūgštį (TCA), kad būtų sukurti Asp struktūriniai vienetai ir tuo pačiu metu išleisti BuOt. Reakcijos laikas buvo 1 valanda, o temperatūra - kambario temperatūra. Po reakcijos atlikite rūgščių-šarmų neutralizavimą, įpilkite didelį kiekį prisotinto natrio chlorido tirpalo, tada nusodinkite etanoliu ir išdžiovinkite vakuume, kad gautumėte Asp kaip baltą kietą medžiagą.
b. Kondensacijos reakcija:
Į kondensacijos reakcijos sistemą įpilkite Asp ir Ala-Hyp-Glu-OtBu, tada atlikite kelias kondensacijos reakcijas, kad gautumėte Epitalon. Šis procesas turi būti atliekamas naudojant skirtingus gydymo būdus.
Pirmas žingsnis: pašalinkite Ala-Hyp apsauginę grupę:
Pirmiausia Ala-Hyp-Glu-OtBu buvo ištirpintas metanolyje, buvo pridėta trichloracto rūgšties (TCA) ir vandens, kad būtų pašalinta Hyp-OtBu apsauginė grupė, naudojama amino grupei apsaugoti, kad susidarytų Ala-Hyp-Glu-OH. Reakciją reikia atlikti kambario temperatūroje, o po reakcijos reakcijos tirpalas apdorojamas NaOH, kad būtų neutralizuotas rūgštingumas.
Antras žingsnis: pašalinkite Glu-OtBu apsauginę grupę:
Tada, po kruopštaus džiovinimo, Ala-Hyp-Glu-OH buvo sumaišytas su Boc-Lys-OtBu, vėl pridėta trichloracto rūgšties ir vandens, o reakcija buvo atlikta kambario temperatūroje. Ši reakcija pašalina Glu-OtBu apsauginę grupę ir sukuria Ala-Hyp-Glu-Lys(Boc)-OtBu.
Trečias žingsnis: pašalinkite Lys apsauginę grupę:
Galiausiai, pridedant trichloracto rūgšties, vandens ir metanolio, pašalinama Boc-Lys-OtBu apsauginė grupė, kad susidarytų Epitalon. Reakciją reikia atlikti kambario temperatūroje, o po reakcijos reakcijos tirpalas apdorojamas NaOH, kad būtų neutralizuotas rūgštingumas.
3. Rezultatų analizė:
Galiausiai gaunamas Epitalon produktas, kurį galima apibūdinti ir išgryninti skirtingais analitiniais metodais. Pavyzdžiui, tokie parametrai kaip grynumas, priemaišos ir svoris gali būti nustatyti naudojant gryninimo metodus, tokius kaip Europos farmakopėja (EP) arba Jungtinių Valstijų farmakopėja (USP).
4. Santrauka:
Epitalon yra kūno stiprintuvas, sudarytas iš keturių aminorūgščių alanino, glutamo rūgšties, asparagino ir lizino. Epitalon cheminės sintezės metodas daugiausia apima kietosios fazės sintezės metodą ir skystosios fazės sintezės metodą, kuriems reikia susieti įvairias aminorūgštis per daugiapakopes reakcijas. Šiam procesui reikia atidžiai kontroliuoti reakcijos sąlygas ir gryninimo būdus, kad būtų užtikrintas aukšto grynumo produktas.
Biosintetinis metodas:
Biosintezės metodas yra mikroorganizmų arba sintetinių fermentų biokatalizė Epitalon paruošimui, įskaitant fermentaciją ir fermentų katalizę.
1. Fermentacijos metodas: Fermentacijos metodas yra biosintezės metodas, naudojant transgeninį mikroorganizmą Escherichia coli Epitalon ekspresijai. Pirmiausia įdėkite Epitalon genų seką į Escherichia coli ir masiškai kultivuokite ją ekspresijai. Tada naudojami įvairūs gryninimo būdai, tokie kaip jonų mainų chromatografija ir gelio chromatografija, kad galiausiai būtų gauti gryni produktai. Konkretūs veiksmai yra tokie:
1.1 Pasirinkite tinkamas bakterijas šeimininkas:
Norint susintetinti Epitalon, būtina ekspresijai parinkti tinkamą šeimininko padermę. Dažniausiai naudojamos bakterijos šeimininkės yra Escherichia coli (Escherichia coli), mielės (Saccharomyces cerevisiae) ir grybai (Aspergillus oryzae). Renkantis bakterijas-šeimininkes, būtina atsižvelgti į tai, ar bakterijos-šeimininkės geba efektyviai sintetinti baltymus, ar gali teisingai sulankstyti ir modifikuoti baltymus ir ar gali gaminti didelio derlingumo tikslinius produktus.
1.2 Sukurkite genų seką ir kloną:
Pasirinkus bakterijas-šeimininkes, Epitalon geno seka (įskaitant alanino, glutamo rūgšties, asparagino ir lizino bazių sekas) turi būti įterpta į šeimininko bakterijas taikant DNR rekombinacijos technologiją. Paprastai genų seka klonuojama į ekspresijos vektorių, apimantį tokius elementus kaip promotoriaus ir terminatoriaus sekos ir pasirenkamas antibiotikų žymeklis.
1.3 Ekspresija ir gryninimas:
Kai klonavimas baigtas, ekspresijos vektorius transformuojamas į šeimininko bakterijas ir tada auginamas. Auginimo proceso metu bakterijos-šeimininkės sintetins Epitalon pagal genų seką ekspresijos vektoriuje. Pagaminus pakankamą produkto kiekį, jį galima išskirti iš ląstelių skirtingais gryninimo metodais ir gauti didelio grynumo Epitalon.
2. Fermentų katalizuojamas metodas: fermentų katalizuojamas metodas yra Epitalono sintezė, susiejant skirtingas aminorūgštis su įvairiais fermentais. Pavyzdžiui, L-glutamato-5-aminazė naudojama glutamato ir butirato reakcijai katalizuoti, kad būtų sintetinamas Glu-OtBu. Tada naudokite L-asparaginazę asparagino ir Ala-Hyp-Glu-OtBu kondensacijos reakcijai katalizuoti, kad gautumėte Epitalon.
Epitalon sintezės metodai daugiausia skirstomi į cheminę sintezę ir biosintezę. Cheminė sintezė šiuo metu yra dažniausiai naudojamas Epitalon sintezės metodas. Biosintezė yra Epitalon paruošimas per mikroorganizmų arba sintetinių fermentų biokatalizę, įskaitant fermentaciją ir fermentų katalizę. Nors biosintetiniai metodai turi didelį potencialą, vis dar reikalingi tolesni tyrimai ir optimizavimas. Epitalon yra potencialus vaistas, turintis plačias taikymo perspektyvas, kuris gali būti naudojamas senėjimo, imuninės sistemos reguliavimo, neuroprotekcijos ir vėžio gydymo srityse. Tuo pačiu metu Epitalon taip pat gali būti naudojamas kaip sveikas maistas ir sveikatos priežiūros produktas, padedantis vartotojams atsispirti senėjimui, sustiprinti imunitetą ir sumažinti ligų riziką. Nors Epitalon tyrimai dar tik pradedami, manoma, kad nuodugniai ištyrus jo mechanizmą ir funkciją, Epitalon taps svarbiu vaistu ir sveikatos priežiūros produktu.