GLP-1(nuoroda:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/glp-1-peptide-cas-87805-34-3.html) susideda iš dviejų tarpusavyje sujungtų polipeptidinių grandinių: peptidinės grandinės su 21 aminorūgšties liekana N-gale (GLP-1[7-27]) ir peptidinės grandinės su 30 aminorūgščių liekanų C-gale. galas (GLP-1 [28-58]), tarp grandinių yra kondensacijos tiltelis. Cheminė GLP-1 formulė yra C165H264N50O55S2, molinė masė yra apie 3,8 kDa, o CAS 87805-34-3. GLP-1 įkrovos būsena keičiasi priklausomai nuo pH. Kai pH yra mažesnis už GLP-1 izoelektrinį tašką, GLP-1 yra teigiamai įkrautas; kai pH yra didesnis nei izoelektrinis taškas, GLP-1 yra neigiamai įkrautas. Fiziologinėmis sąlygomis GLP-1 paprastai būna neigiamai įkrautas. Pasižymi dideliu jautrumu redoksui ir jautrumui proteazėms. Esant fiziologinėms sąlygoms, GLP-1 dažnai greitai hidrolizuojamas proteazių, tokių kaip tripsinas, todėl praranda savo biologinį aktyvumą. Be to, šiluminė energija, pH, metalų jonai ir kiti veiksniai taip pat turės įtakos GLP stabilumui-1. Siekdami pagerinti GLP{10}} stabilumą, tyrėjai paprastai taiko įvairius metodus, kad pagerintų, pvz., cheminį modifikavimą ir molekulinės struktūros koregavimą.
Izoelektrinis taškas:
GLP-1 yra polipeptidinis hormonas, kurio izoelektrinis taškas (pI) yra maždaug 5,1. Izoelektrinis taškas yra pH vertė, kuriai esant tam tikrame tirpale yra vienodas teigiamai ir neigiamai įkrautų jonų skaičius. Kai medžiaga yra savo izoelektriniame taške, ji neturi grynojo krūvio, todėl ji nebus veikiama elektroforezės jėgų elektriniame lauke ir todėl nejudės į nė vieną polių.
Kadangi GLP-1 izoelektrinis taškas yra žemesnis už fiziologinės aplinkos pH vertę, jis bus teigiamai įkrautas in vivo. Tokios savybės leidžia GLP-1 greitai pereiti per ląstelės membraną per kai kuriuos molekulinius transporterius, tokius kaip GLP-1 receptorius (GLP-1R), ir prisijungti prie GLP-1R. ląstelėje, todėl atlieka įvairias fiziologines funkcijas. GLP-1 izoelektrinis taškas yra maždaug 5,9, tai yra, kai jo pH yra =5,9, GLP-1 peptido molekulės su grynuoju krūviu krūvio skaičius yra lygus nuliui. Tai reiškia, kad esant skirtingoms pH sąlygoms, GLP{11}} įkrovos būsena taip pat pasikeis ir taip paveiks jo biologinį aktyvumą organizme.
Be izoelektrinio taško, GLP{0}} taip pat turi kitų fizinių ir cheminių savybių bei struktūrinių savybių, tokių kaip molekulinė masė, aminorūgščių seka, erdvinė konfigūracija, hidrofiliškumas, tirpumas ir kt. Šios fizinės ir cheminės savybės bei struktūrinės savybės yra labai svarbūs GLP-1 veikimui ir funkcijoms in vivo, taip pat yra pagrindiniai GLP-1 tyrimų ir taikymo aspektai.
mokestis:
GLP-1 yra polipeptidinis hormonas. Jo molekulinėje struktūroje yra dvi natūralios aminorūgščių liekanos, cisteinas ir leucinas. Šios liekanos tam tikromis sąlygomis gali patirti oksidacijos reakcijas, sudarydamos disulfidines jungtis (SS jungtis). Taip paveikiamos GLP-1 įkrovimo savybės.
Fiziologinėje aplinkoje GLP{0}} paprastai pasižymi teigiamai įkrauta savybe. Taip yra todėl, kad jo izoelektrinis taškas yra apie 5,1, o tai yra žemesnė už fiziologinę aplinką, kurios pH vertė yra 7,4, todėl amino grupė N-gale yra iš dalies protonuota. kad visa molekulė būtų teigiamai įkrauta. Tokiu atveju GLP-1 gali greitai patekti ir sujungti su GLP-1R ląstelėje per tam tikrus transporterius, tokius kaip GLP-1 receptorius (GLP-1R) ir atlieka įvairias fiziologines funkcijas. GLP{10}} įkrovos būsena keičiasi priklausomai nuo pH. Kai pH yra žemesnis už GLP-1 izoelektrinį tašką, GLP-1 yra teigiamai įkrautas; kai pH yra didesnis nei izoelektrinis taškas, GLP{13}} yra neigiamai įkrautas. Fiziologinėmis sąlygomis GLP-1 paprastai yra neigiamai įkrautas.
Tačiau tam tikromis aplinkybėmis GLP-1 SS ryšys gali būti sumažintas, todėl jis praranda teigiamą krūvį ir įgauna grynojo įkrovimo būseną arba neigiamo krūvio savybes. Laboratorijoje šią redukcijos reakciją gali paskatinti reduktorius, pvz., DTT (ditiotreono rūgštis), taip pakeičiant GLP-1 įkrovos būseną.
Apibendrinant galima pasakyti, kad GLP{0}} įkrovos būseną veikia daugelis veiksnių, įskaitant jo izoelektrinį tašką, chemines funkcines grupes molekulėje ir išorines aplinkos sąlygas. Šios savybės ir savybės yra labai svarbios GLP-1 funkcijai ir vaidmeniui in vivo ir yra pagrindiniai GLP-1 tyrimų ir taikymo aspektai.
stabilumas:
GLP{0}} turi didelį redokso jautrumą ir jautrumą proteazėms. Esant fiziologinėms sąlygoms, GLP-1 dažnai greitai hidrolizuojamas proteazių, tokių kaip tripsinas, todėl praranda savo biologinį aktyvumą. Be to, šiluminė energija, pH, metalų jonai ir kiti veiksniai taip pat turės įtakos GLP stabilumui-1. Siekdami pagerinti GLP-1 stabilumą, tyrėjai dažniausiai taiko įvairius metodus, tokius kaip cheminis modifikavimas ir molekulinės struktūros koregavimas.
Dreifo laikas:
GLP-1 (į gliukagoną panašus peptidas-1) yra polipeptidinis hormonas, kurį galima aptikti ir kiekybiškai įvertinti masės spektrometrijos metodu. Skysčių chromatografijos-masių spektrometrijos (LC-MS) technologijoje GLP-1 dreifo laikas reiškia laiką, per kurį jonai dreifuoja dėl susidūrimų elektriniame lauke ir galiausiai pasiekia detektorių. Dreifo laikas reiškia laiką, per kurį tirpale esančios molekulės praeina per chromatografinę kolonėlę, kuri gali atspindėti molekulių dydį, formą ir krūvio būseną. Peptidų molekulėms, tokioms kaip GLP-1, dreifo laikas paprastai yra trumpas ir gali būti baigtas per kelias minutes.
Dreifo laikas yra vienas iš svarbių masės spektrometrijos technologijos analizės parametrų, kurį galima naudoti norint nustatyti skirtumą tarp skirtingų junginių ir atskirti izomerus ir pan. GLP-1 atveju dreifavimo laikas gali būti naudojamas nustatyti skirtumą tarp jis ir kiti peptidai ar priemaišos ir toliau naudojami kiekybinei analizei.
Apskritai, naudojant LC-MS masės spektrometriją, dreifo laiką paveiks daugelis veiksnių, tokių kaip masės spektrometro tipas, jonizacijos režimas, susidūrimo dujų tipas, įtampa, temperatūra ir kt. Todėl dreifo laiką naudojant kaip identifikavimo ir kiekybinio įvertinimo pagrindu, eksperimentines sąlygas reikia optimizuoti ir standartizuoti, kad būtų gauti atkuriami rezultatai.
GLP{0}} dreifo laikas nurodo laiką, kurio reikia, kad jo jonai pasiektų detektorių dėl dreifo elektriniame lauke, kuris gali būti naudojamas kaip analitinis parametras LC-MS technologijoje, siekiant nustatyti ir kiekybiškai įvertinti peptidus ir jų izomerų kūnas ir kt.
Apibendrinant galima pasakyti, kad GLP{0}} yra maža peptido molekulė, kuri yra labai hidrofiliška ir stabili fiziologinėje aplinkoje, bet taip pat jautri redokso ir proteazių jautrumui. Fizinių GLP-1 savybių supratimas yra labai svarbus kuriant naujus GLP-1 vaistus ir tiriant jų biologinę veiklą.