IPTG reagentas CAS 367-93-1

IPTG reagentasnuo 2008 m. didžiausią dėmesį skiriame organinės sintezės technologijai. Galime sukurti aukštos-kokybės produktus, visiškai priklausydami nuo mūsų išskirtinės mokslinių tyrimų ir plėtros komandos. IPTG, CAS 367-93-1, cheminė struktūra sudaryta iš izopropilo - Jį sudaro D-tiogalaktozido ir fosfato grupės. Tarp jų - D-tiogalaktozidas yra galaktozės analogas, kuriame sieros atomas pakeičia deguonies atomą. Ši ypatinga glikozidų struktūra leidžia IPTG prisijungti prie DNR ir sukelti genų ekspresiją. IPTG mažai tirpsta vandenyje, bet gali gerai ištirpti fiziologiniame fiziologiniame tirpale ir fosfatiniame buferyje. Jis yra rūgštus, jo pKa vertė yra 4,5, o tai yra susijusi su fosfatų grupe jo molekulinėje struktūroje. Nelengva kristalizuotis gryname vandenyje, tačiau gali susidaryti kristalai didelės koncentracijos tirpaluose arba pridėjus kitų junginių. Dėl savo gebėjimo sukelti bakterijų baltymų ekspresiją IPTG yra jautrus tam tikriems mikroorganizmams.

Mes nedarome nieko gėdos Didžiajai chemijai! Nepasitikėkite neprotinga kaina, palyginkite kainą to paties lygio kokybe.

Biosintezės metodasIPTG reagentaspaprastai naudoja katalizinį mikroorganizmų ar fermentų veikimą, kad galaktozę paverstų izopropilo grupės - - D-tiogalaktozidu.

Galaktozė kaip žaliava

Pirma, kaip žaliavą būtina naudoti galaktozę. Galaktozė yra penkių anglies cukrus, kuris yra plačiai paplitęs gamtoje ir gali būti gaunamas sirupo arba kristalų pavidalu. Biosintezės metu galaktozė paverčiama izopropilu per daugybę fermentinių reakcijų - - D-tiogalaktozidas.

Mikrobų kultūra ir galaktozės metabolizmas

Toliau būtina pasirinkti tinkamus mikroorganizmus kaip katalizatorius, kurie paprastai apima bakterijas, mieles ir pelėsius. Kultivuokite šiuos mikroorganizmus auginimo terpėje, kad jie galėtų augti ir daugintis tinkamomis sąlygomis. Tuo tarpu galaktozė, kaip maistinė medžiaga, yra suvartojama mikroorganizmų ir metabolizuojama į norimą tarpinį produktą, vykstant fermentinėms reakcijoms. Specifinis reakcijos mechanizmas ir cheminė lygtis šiame etape skiriasi priklausomai nuo mikroorganizmų tipų ir auginimo sąlygų.

Izomerizacijos reakcijos metu susidaro izopropilo grupė- - D-tiogalaktozido-5'-fosfato esteris

Veikiant mikroorganizmų gaminamiems fermentams, tarpiniuose produktuose vyksta izomerizacijos reakcija, susidaro izopropilo grupės - - D-tiogalaktozido-5'- fosfato esteris. Šio etapo reakcijos mechanizmas yra perkelti galaktozės hidroksilo grupę į uridino trifosfatą, sukuriant izopropilo grupės - - D- tiogalaktozido-5'-fosfatą ir uridino difosfatą. Konkreti cheminė lygtis yra tokia:

(CH₂oi)₂CHOH-OH + C₃H₇ClN₂O₂S + UDP → (CH₂oi)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

Apsaugos pašalinimo grupė sukuria izopropilo grupę- - D-tiogalaktozidą

Paskutinis žingsnis yra pašalinti apsauginę grupę iš izopropilo grupės- - D-tiogalaktozil-5 '- fosfato esterio pavertimas tiksliniu produkto izopropil- - D-tiogalaktozidu. Šiam veiksmui paprastai reikia naudoti rūgšties arba šarmo tirpalą kaip katalizatorių reakcijai skatinti. Konkreti cheminė lygtis yra tokia:

(CH₂oi)₂CHOH-O-P(U) + H₂O → (CH₂oi)₂CHOH-OH + P (i)

Atskyrimas ir valymas

Naudojant atskyrimo ir gryninimo metodus, tokius kaip ekstrahavimas, adsorbcija, chromatografija ir kt., tikslinis produktas izopropilas yra išgrynintas - - D- tiogalaktozidas buvo ekstrahuotas iš reakcijos mišinio. Šio etapo tikslas – pašalinti nešvarumus ir pagerinti produkto grynumą, kad jis atitiktų praktinio pritaikymo poreikius

IPTG reagentasIzopropil- -D-tiogalaktozidas, angliškas pavadinimas IPTG. Kaip placebo induktorius, X-gal yra chromogeninis substratas, kurie abu naudojami mėlynai-baltai atrankai. IPTG gali paskatinti Chemicalbook vektoriaus lac operono DNR segmentą susintetinti -galaktozidazės amino-galinį fragmentą, kuris galėtų pasiekti intrageninį komplementaciją (komplementaciją) su defektuota -galaktozidaze, koduojama šeimininkų ląstelių.

1. Biomedžiagos paruošimas:

IPTG gali būti naudojamas ruošiant tam tikras biomedžiagas, tokias kaip polisacharidai, liposomos ir kt. Prisijungdamas prie specifinių ląstelių membranų ar baltymų, IPTG gali skatinti specifines fiziologines ląstelių ar audinių funkcijas, suteikdamas naujas tyrimų priemones ir terapines strategijas biomedicinos inžinerijos sričiai. Pavyzdžiui, naudojant IPTG kaip induktorių, jis gali skatinti tikslinių baltymų ekspresiją ir sekreciją inžinerinėse bakterijose arba mielių ląstelėse, kurios gali būti naudojamos specifinių funkcijų biomedžiagoms gaminti.

 

Šios biomedžiagos gali būti polisacharidai, liposomos, baltymų kompleksai ir kt.
Biomedžiagų paruošimo procese IPTG naudojimas gali supaprastinti gamybos procesą, pagerinti gamybos efektyvumą ir sumažinti gamybos sąnaudas. Tuo pačiu metu, kontroliuojant IPTG pridėjimo kiekį ir trukmę, galima tiksliai reguliuoti tikslinių baltymų ekspresijos lygius ir biomedžiagų savybes.

2. Narkotikų patikra:

 

IPTG daugiausia naudojamas tikrinant vaistus, siekiant sukelti tikslinių genų ekspresiją ir tikrinti tikslinių genų ekspresijos produktus. Tiksliau, IPTG gali tarnauti kaip laktozės operonų induktorius, prisijungdamas prie lac|produktai, sukeliantys lac|konformacinius pokyčius produktai yra atokiau nuo lacO, taip suaktyvinant transkripciją ir pasiekiant aukštą tikslinio geno ekspresiją. Mėlynos baltos spalvos atrankos proceso metu IPTG indukuoja transformantus be rekombinantinių plazmidžių, kad susidarytų mėlynos kolonijos, esant chromogeniniam substratui X-gal.

Kai įterpiami svetimi fragmentai, susidarę peptidų fragmentai prarandami. Komplementinis gebėjimas: transformuoti rekombinantai, turintys rekombinantinių plazmidžių, gali sudaryti tik baltą Escherichia coli ant chromogeninės indukcijos terpės. Šis vaistų atrankos metodas, pagrįstas spalvų pokyčiais, vaidina svarbų vaidmenį tiriant su konkrečiomis ligomis susijusius baltymus ir ieškant naujų vaistų taikinių.

3. Genetiniai tyrimai:

 

IPTG dažnai naudojamas kaip molekulinis įrankis atliekant genetinius tyrimus. Prisijungdamas prie konkrečios genų sekos, IPTG gali reguliuoti to geno ekspresijos lygį, taip tirdamas jo ryšį su konkrečiais fenotipais ar ligomis.
Genetiniuose tyrimuose IPTG daugiausia naudojamas kaip induktorius ir gali imituoti laktozės indukcinį poveikį laktazei. Paprastai jis naudojamas egzogeninių genų ekspresijai sukelti, ypač atliekant molekulinės biologijos ir genų inžinerijos tyrimus.
Naudojant IPTG, jis jungiasi su tiksliniais genais ekspresijos šeimininkuose, tokiuose kaip Escherichia coli. Konstruodamas tikslinį geną su atitinkamais promotoriais ir reguliavimo elementais į ekspresijos vektorių, jis gali gaminti baltymus Escherichia coli ląstelėse. Šis sukeltas poveikis yra labai svarbus tiriant genų funkciją, baltymų sąveiką ir kuriant naujus vaistus ir biomedžiagas.

Be to, IPTG taip pat gali būti naudojamas kaip baltymų kristalizacijos eksperimentų induktorius, skatinantis baltymų kristalizaciją. Jo veikimo mechanizmas yra pakeisti baltymų konformaciją, prisijungiant prie hidrofobinių baltymų regionų, taip skatinant baltymų molekulių agregaciją ir kristalizaciją.

Šis agregacijos ir kristalizacijos procesas yra grįžtamas, todėl baltymų kristalizaciją galima paskatinti pridedant IPTG, arba baltymų kristalus galima ištirpinti pašalinus IPTG.

4. Taikymas žemės ūkyje:

 

Taikant žemės ūkį,IPTG reagentaskaip naujo tipo biopesticidas, turi specifinį herbicidų poveikį. Tai gali sutrikdyti normalią galaktozės apykaitą augaluose ir taip paveikti normalų jų augimą. Šis trukdžių metodas yra jautresnis kai kurioms piktžolėms, todėl naudojant IPTG galima efektyviai pašalinti piktžoles, nepakenkiant pasėliams. Tuo tarpu, kadangi IPTG yra naujo tipo biopesticidas, jis yra draugiškesnis aplinkai ir didesnis saugumas žmonėms ir gyvūnams, palyginti su tradiciniais cheminiais pesticidais. Todėl IPTG turi plačias taikymo perspektyvas žemės ūkio srityse.

Galimas genų ekspresijos reguliavimo sutrikimas

 

Nespecifinė indukcija

IPTG, kaip induktorius, turi tam tikrą savo veikimo specifiškumą, tačiau kai kuriais atvejais gali atsirasti ne{0}}specifinė indukcija. IPTG ne tik skatina tikslinių genų ekspresiją, bet taip pat gali paveikti kitų genų ekspresiją ląstelėse. Taip gali būti dėl to, kad po to, kai IPTG prisijungia prie represoriaus baltymo, jis pakeičia represoriaus baltymo konformaciją ir funkciją, todėl jis daro tam tikrą poveikį kitiems operonams, taip sumažindamas netikslinio geno ekspresijos slopinimą.

Dėl nespecifinės indukcijos gali pakisti tarpląstelinių baltymų ekspresijos profiliai, atsirandantys netikėti baltymai, kurie ne tik trukdo analizuoti ir vertinti eksperimentinius rezultatus, bet ir gali turėti neigiamą poveikį normalioms fiziologinėms ląstelių funkcijoms. Pavyzdžiui, kai kuriuose baltymų ekspresijos eksperimentuose po indukcijos IPTG, be to, kad buvo nustatyta tikslinio baltymo ekspresijos padidėjimas, taip pat buvo nustatytas kai kurių kitų nežinomų baltymų ekspresijos reguliavimas. Šie nespecifiniai išreikšti baltymai gali trukdyti tikslinio baltymo gryninimui ir funkciniams tyrimams.

Sukeltos išraiškos negrįžtamumas

Įprastomis aplinkybėmis, pašalinus induktorių, genų ekspresija turėtų grįžti į iki indukcijos lygį. Tačiau tyrimai parodė, kad IPTG sukelta genų ekspresija gali turėti tam tikrą negrįžtamumo laipsnį. Kai IPTG naudojamas genų ekspresijai sukelti, net jei IPTG pašalinamas, genų ekspresijos lygis vis tiek gali išlikti aukštas ir negali būti atkurtas iki pradinio lygio prieš indukciją.

Tokį negrįžtamumą gali lemti ilgalaikiai IPTG sukelti {0}viduląsteliniai pokyčiai, pvz., chromatino struktūros pokyčiai ir transkripcijos faktorių modifikacijos, kurios palaiko aukštą genų transkripcijos aktyvumo lygį. Sukeltos ekspresijos negrįžtamumas gali sukelti didelių sunkumų atliekant eksperimentus, ypač eksperimentuose, kuriems reikalingas tikslus genų ekspresijos lygių reguliavimas, todėl eksperimentiniai rezultatai gali būti netikslūs ir neatkuriami.

Dėl savo stabilios molekulinės struktūros ir patikimo indukuojančio aktyvumo IPTG tapo nepakeičiamu reagentu molekulinės biologijos laboratorijose visame pasaulyje. Jis plačiai naudojamas rekombinantinių baltymų ekspresijoje, genų funkcijų tyrimuose ir mikrobų inžinerijos eksperimentuose, užtikrinant stabilų indukcinį poveikį moksliniams tyrimams ir pramoninei gamybai. Ilgalaikis-dėmesys organinės sintezės technologijai ir griežta kokybės kontrolė užtikrina, kad mūsų IPTG produktai išliktų aukšto grynumo, stabilumo ir nuoseklumo, veiksmingai atitiktų griežtus mokslinių eksperimentų ir pramoninių pritaikymų reikalavimus.

Palaikomi profesionalios tyrimų ir plėtros komandos, mes ir toliau optimizuojame sintezės procesus ir geriname gaminio našumą, kad geriau aptarnautume pasaulio mokslininkus ir gamintojus. Dėl savo aiškaus veikimo mechanizmo, stabilių savybių ir plataus pritaikomumo IPTG išliks pagrindiniu gyvosios gamtos mokslų tyrimų reagentu, o mes ir toliau teiksime aukštos-kokybės produktus ir profesionalią techninę pagalbą biotechnologijų pažangai.

Populiarus Žymos: iptg reagent cas 367-93-1, tiekėjai, gamintojai, gamykla, didmeninė prekyba, pirkti, kaina, urmu, parduoti