Protinazės k milteliai CAS 39450-01-6

Protinazės k milteliaiis a highly efficient, non-specific serine protease widely used in molecular biology and biochemistry, mainly for degrading proteins and removing contaminating proteins from nucleic acid preparations. It is derived from the fungus Engyodontium album (formerly Tritirachium album) and maintains its activity over a wide range of temperatures (20-60℃) and pH (4-12), net kai inkubuojama tirpale, kuriame yra SDS (0.5-1%) arba karbamido (4m) denatūravimo sąlygomis .

Fermentas efektyviai suskaido daugybę baltymų, įskaitant RNazę ir DNazę, suskaidydamas peptidų ryšius (pirmiausia hidrolizuojant alifatinių/aromatinių aminorūgščių karboksilo galą), todėl yra naudojamas nukleazės pašalinimui DNR/RNR ekstrakcijoje, kad būtų užtikrinta naikinimo rūgšties integravimas ., be to, yra įprasta, kad ji būtų įprasta, be to, įprasta, kad ji būtų įprasta, be to, yra bendra, kad ji būtų įprasta, kad būtų galima įprasti DNR/RNR ekstrakcija (e . g ., parafino įterpti mėginiai), ląstelių lizės ir proteomikos tyrimai .

Protinazės k milteliai paprastai tiekiami liofilizuotos formos, kuri yra labai stabili ({-20 laipsnis ilgalaikiam laikymui) ir turi būti ištirpinami buferyje (e {. g . Tris-HCl, EDTA), prieš pradedant {.. Fermento aktyvumas . Reikia vengti savarankiško pažeidimo atliekant valdymą ir inaktyvuojant šilumą ir inaktyvuojant 65 laipsnius, rekomenduojama {. dėl jo stipraus baltymų hidrolizavimo gebėjimo, norint išvengti odos ar gleivinės membranos, reikia kruopščios apsaugos, norint išvengti odos ar gleivinės membranos.

Protinazės k milteliai, taip pat žinomas kaip proteinazė K arba EC 3.4.21.14, yra serino proteazė, išskirta ir išgryninta iš Tritirachium albumo limcer ., nes pirmoji jo izoliacija Wolfgang Ebeling et al . 1974 m. specifiškumas .

In the process of DNA and RNA extraction, the main function of proteinase K is to degrade proteins bound to nucleic acids, allowing DNA or RNA to be free in solution for subsequent extraction and purification. Due to its stability and high activity in denaturing agents such as urea and SDS, proteinase K is commonly used for the isolation of plasmids or genomic DNA and RNR .

Protinazė K gali slopinti rNazės aktyvumą ir apsaugoti RNR nuo skilimo .

1. DNR ir RNR ekstrahavimas

 

DNR ekstrahavimas: Protease K gali hidrolizuoti histonus, kurie jungiasi prie DNR, leisdama DNR išsiskirti tirpale . V
RNR ekstrahavimas: RNR ekstrahavimo proceso metu RNR fermentai dažniausiai būna aplinkoje, o pačioje mėginių sistemoje taip pat gali būti RNR fermentų, todėl RNR yra labai jautri skilimui . pridedant nedidelį kiekį kiekio kiekį

2. in situ hibridizacijos technologija

 

In in situ hybridization technology, proteinase K is commonly used for pre hybridization processing to digest proteins surrounding the target DNA, increase the chance of probe binding to the target nucleic acid, and enhance the hybridization signal. However, it should be noted that when the concentration of proteinase K is too high, the digestion time is too long, or the incubation temperature is too high, it can cause damage to the Ląstelių struktūra, dėl kurios audinių pjūviai išsiskleidė ir ląstelių branduolių išnykimas, taip paveikdama hibridizacijos rezultatus ., todėl praktiniame pritaikyme būtina griežtai kontroliuoti proteinazės k . koncentracijos ir apdorojimo laiką.

3. viruso inaktyvacija ir dezinfekavimas

 

Proteazė K, dėl stipraus proteolitinio aktyvumo, gali būti naudojama viruso inaktyvacijai ir dezinfekavimui . tyrimai parodė, kad gryno vandens ir buitinių nuotekų gydymas tam tikra baltymo K koncentracija gali efektyviai inaktyvuoti virusus, sukeltus potencialaus potencialo, nes tai gali sumažinti potencialo kenksmingumą, nes tai gali sumažinti potencialo kenksmingumą, nes tai gali sumažinti potencialo kenksmingumą, nes tai gali sumažinti potencialo kenksmingumą, nes tai gali sumažinti potencialo kenksmingumą, nes viruso inaktyvinis dezinfekavimas gali sumažinti potencialo kenksmingumą, nes tai gali sumažinti potencialo kenksmingumą, nes tai gali sumažinti potencialo kenksmingumą. Žmogaus kūnas, jo gamyba ir transportas yra saugūs be negrįžtamos aplinkos taršos .

4. Western blotting ir impulsų elektroforezė

 

Protease K has also been widely used in the preparation of chromosome DNA for pulsed electrophoresis, Western blotting, and other experiments. In Western blot experiments, proteinase K can be used to remove non-specific proteins from the sample, improving the specificity and sensitivity of the blot. In pulse electrophoresis experiments, proteinase K can degrade protein Priemaišos DNR mėginiuose ir pagerina elektroforezės efektyvumą .

5. baltymų aptikimas ir identifikavimas

 

Protinazės k milteliaican also be used for the detection and identification of certain proteins. For example, in the study of transmissible spongiform encephalopathy (TSE), proteinase K can be used to digest proteins in brain tissue samples, and to identify the presence of prion proteins by detecting the resistance of pathogenic prions to proteinase K. In addition, proteinase K can also Būkite naudojami eksperimentams, tokiems kaip fermentų lokalizacijos lokalizavimas ant ląstelių membranų ir pašalinant katijoninius baltymus, sujungtus su endotoksinais (tokiais kaip lizocimas ir ribonukleazė a) .

1. Medicinos laukas

 

Klinikinis naudojimas: Protease k turi tam tikrą medicininę vertę medicinoje ., pavyzdžiui, nevirškinant skrandžio proteazę, bronchito gydymą rūgštine proteaze, gydant vaskulitą elastaze ir tt ., be to, tripsinas, chimotripsinas ir kt. pleuros serosaliniai adhezijos .
Viruso aptikimas ir diagnozė: Protease K taip pat gali naudoti viruso aptikimą ir diagnozę ., virškindama baltymus viruso mėginyje ir atskleidžiant viruso nukleorūgštį, tai suteikia patogumą vėlesniems nukleorūgščių tyrimams ..

2. pramonės sektorius

 

Odos pramonė: „Protease K“ naudojama odos pramonėje plaukų šalinimui ir minkštinimui, kuris gali sutaupyti laiko ir pagerinti darbo higienos sąlygas .
Tekstilės pramonė: Proteazės k galima naudoti tekstilės pramonėje, tokiose kaip šilko deginimas .
Maisto pramonė: „Protease K“ gali būti naudojama maisto pramonėje mėsos konkursui, alkoholio paaiškinimui ir tt .
Ploviklis: fermentas pridedamas skalbinių ploviklis yra naujas produktas plovikliuose . skalbinių ploviklis, kuriame yra šarminės proteazės

Struktūrinės charakteristikos

 

Protinazės k molekulinė masė yra maždaug 28900 daltonų (28 . 9 kDa), taip pat yra literatūros pranešimų apie 29 . 3 kDa. Jos aminorūgščių seka ir trimatė erdvinė struktūra yra labai panaši į serino proteazės šeimos subtilisiną, tačiau taip pat yra keletas unikalių savybių.

Disulfido jungčių struktūra: Proteazės k molekulėse yra disulfidinių jungčių, kurios padidina jų stabilumą ir leidžia jiems palaikyti aktyvumą plačioje pH diapazone ir aukštos temperatūros sąlygose .
Ca ² ⁺ rišamosios vietos:Protinazės k milteliaiSudėtyje yra dvi CA ² ⁺ surišimo vietos, kurios, nors ir toli nuo aktyvaus centro, yra labai svarbūs fermento katalizinio aktyvumo palaikymui ., pašalinus Ca ² ⁺, proteazės K praras apie 80% jo aktyvumo, o pakartotinis Ca ⁺ ⁺ gali atkurti tik iš dalies jo veiklą .}.
Katalitinė triada: Proteazė k turi katalizinę triadą ASP-His 69- Ser224, tai yra pagrindinė jo hidrolizinio aktyvumo struktūra .

Veiksmo mechanizmas

 

Prease k gali pirmenybę hidrolizuoti esterių ir peptidų ryšius, esančius greta hidrofobinių aminorūgščių C-galo, sieros turinčių aminorūgščių ir aromatinių aminorūgščių, hidrolizuodami baltymus į trumpus peptidus . jo veikimo mechanizmą daugiausia įtraukiami šie veiksmai: šie veiksmai daugiausia apima šiuos veiksmus: trumpus peptidus .} veikimo mechanizmas daugiausia įtraukia šiuos veiksmus:

Fermento substrato surišimas: Po proteazės k sumaišomas su substratu, substratas jungiasi su aktyvia fermento vieta, sudarydamas fermento substrato kompleksą .
Katalitinė reakcija: veikiant aktyvioji vieta, substrato peptido jungtis yra hidrolizuojama, kad būtų sudarytas produktas, atskirtas nuo fermento .
Dėl stipraus proteazės kilimo poveikio jis yra pagrindinis reagentas įvairiose biocheminėse reakcijose, ypač DNR ir RNR ekstrahavimo procesuose . proteazės k gali efektyviai skaidyti baltymus, sujungtus su nukleorūgščių rūgštimis, išsiskiria branduolių rūgštys.}} aktyvumas}}}}}}}}} aktyvumas}}}}}}}}} aktyvumui}}}}} aktyvumui}}}}}}} aktyvumui}}}}}}} aktyvumui}}}}}}} padidėja, sumažindama branduolių rūgščių skilimą.}}} aktyvumą, mažindama branduolių rūgščių skilimą.}}} aktyvumą, mažindama branduolių rūgščių skilimą..

Protinazės k milteliai, kaip labai aktyvi ir substrato specifinė serino proteazė, turi platų biochemijos, molekulinės biologijos, medicinos ir pramonės taikymo asortimentą ., jis gali skaidyti baltymus, jungiančius su nukleorūgštimis ir atpalaiduojančias nukleorūgštis; Padidinkite zondų galimybę prisijungti prie tikslinių nukleorūgščių in situ hibridizacijos technologija; Naudojamas viruso inaktyvacijai ir dezinfekavimui; Pašalinkite baltymų priemaišas Western blot ir impulsų elektroforezės eksperimentuose; Turi medicinos vertę medicinos srityje; Naudojami pramoninėse srityse, tokiose kaip odos perdirbimas, tekstilės pramonė, maisto pramonė ir ploviklių gamyba .. Tačiau naudojant „Proteine K“, reikia atkreipti dėmesį į jo laikymo metodą ir naudojimo sąlygas, kad būtų užtikrintas jo stabilumas ir aktyvumas .

Populiarus Žymos: „Proteine K Powder Cas“ 39450-01-6, tiekėjai, gamintojai, gamyklos, didmeninė prekyba, pirkti, kaina, biria, parduodama, parduodama.