LC553 aminorūgščių seka yra Ac Glu Glu Met Gln Arg Arg Ala Asp-NH2, o jos konformaciniams požymiams daugiausia būdingas - sukimasis ir atsitiktinis susisukimas. Kampas - sudaro vandenilio jungtį tarp pirmosios liekanos karbonilo deguonies ir ketvirtosios liekanos imino vandenilio, todėl peptidinė grandinė susilanksto 180 laipsnių kampu. Ši struktūra LC553 užima centrinę vietą. Pavyzdžiui, - kampinė Glu1-Asp8 konformacija gali stabilizuoti peptidinių grandinių C-galinę sritį, o atsitiktinis Met3-Arg6 susisukimas suteikia jai konformacinio lankstumo. Šis „kietas lankstus“ derinys leidžia LC553 išlaikyti jungimosi aktyvumą su SNAP-25, tuo pačiu prisitaikant prie skirtingų mikroaplinkų konformacinių reikalavimų.

Eksperimentiniai duomenys rodo, kad fosfatiniame buferiniame tirpale, kurio pH yra 7,4, LC553 apskrito dichroizmo (CD) spektras rodo neigiamą smailę ties 200 nm, o tai rodo, kad jam daugiausia būdingas atsitiktinis susisukimas; Pridėjus 10% trifluoretanolio (TFE), prie 220 nm pasirodė teigiama smailė, rodanti - kampo konformacijos padidėjimą. Šis konformacinis derinimas yra glaudžiai susijęs su jo funkcija: odos raginiame sluoksnyje atsitiktinė garbanota struktūra gali sumažinti sąveikos energiją tarp peptidinių grandinių ir lipidų dvisluoksnių sluoksnių, skatindama prasiskverbimą; Makrofaguose beta kampo konformacija padidina jo jungimosi afinitetą su SNAP-25 ir slopina autofagosomų lizosomų susiliejimą.

Tretinę LC553 struktūrą lemia hidrofobinė šerdies ir paviršiaus krūvio pasiskirstymas. Hidrofobinės liekanos (Met3, Ala7) yra peptidinės grandinės centre, sudarydamos stabilią hidrofobinę šerdį, o įkrautos liekanos (Glu1, Glu2, Arg5, Arg6, Asp8) pasiskirsto paviršiuje. Ši „vidaus hidrofobinė, išoriškai hidrofilinė“ struktūra leidžia tikslingai prisijungti naudojant šiuos mechanizmus:
Krūvio papildomumas: SNAP-25 N-galinėje srityje yra daug šarminių liekanų (tokių kaip Lys ir Arg), o rūgštinės liekanos LC553 paviršiuje (Glu1, Glu2, Asp8) sustiprina jungimąsi dėl elektrostatinės sąveikos;

Hidrofobinis tvirtinimas: Met3 ir Ala7 hidrofobinės šoninės grandinės įterpiamos į hidrofobinę SNAP-25 kišenę, kad stabilizuotų komplekso konformaciją;

Konformali entropijos kompensacija: dinaminis atsitiktinai susuktos srities reguliavimas gali sumažinti entropijos praradimą surišimo proceso metu ir padidinti laisvąją surišimo energiją.

LC553 konformacinė dinamika ne tik lemia jo gebėjimą prisijungti prie SNAP-25, bet ir pasiekia funkcinę plėtrą, paveikdama ląstelių signalizacijos kelius. Pavyzdžiui:
Kovos su raukšlėmis mechanizmas: odos fibroblastuose,SNAP 8 injekcijastabdo SNARE kompleksų susidarymą, mažina acetilcholino išsiskyrimą, taip sumažindamas raumenų susitraukimų dažnį ir sumažindamas raukšlių gylį 63,13 %;

Imuninės reguliavimo mechanizmas: makrofaguose, užkrėstuose Mycobacterium leprae, LC553 stabilizuoja SNAP29 baltymą, atkuria autofagosomų lizosomų susiliejimą ir sumažina bakterijų kiekį 70 %;

Priešuždegiminis mechanizmas: LC553 gali konkurencingai prisijungti prie 7 nAChR subvieneto, slopinti TNF - - sukeltą NF - κ B branduolio translokaciją ir sumažinti IL-6 ir IL-8 sekreciją.

Šis kryžminio masto efektas atsiranda dėl dinamiško peptidinės grandinės konformacijos koregavimo: antiraukšlinės terapijos metu LC553 daugiausia pasižymi atsitiktiniu susisukimu, sumažindamas ne-specifinį prisijungimą prie raumenų ląstelių; Imuninės sistemos reguliavimo srityje - kampo konformacijos sustiprinimas pagerina jo specifinį atpažinimo gebėjimą naudojant tikslinius baltymus.

Kaip pagrindinis LC553 pristatymo tikslas, odos barjerinėje funkcijoje dominuoja stratum corneum (SC). SC susideda iš keratinocitų (plytų) ir tarpląstelinių lipidų (skiedinio), sudarančių tankią „plytų sienelės struktūrą“. Tarp jų lipidų matricą daugiausia sudaro keramidai, cholesterolis ir laisvosios riebalų rūgštys, o jų išsidėstymas lemia peptidinių grandinių įsiskverbimo efektyvumą.

Eksperimentai parodė, kad dėl LC553 molekulinės masės (1075,16 Da) ir hidrofiliškumo (logP=-2.1) sunku tiesiogiai prasiskverbti į SC. Tačiau jo konformacinė dinamika suteikia galimybę įveikti kliūtis:

Atsitiktinis garbanos sumažina prasiskverbimo energijos barjerą: SC lipidiniame dvisluoksnyje atsitiktinai susisukusi LC553 struktūra gali sumažinti sąveikos energiją su lipidų molekulėmis, sumažindama įsiskverbimo energijos barjerą nuo tradicinio peptido 15 kcal/mol iki 8 kcal/mol;

Kampas - skatina tarpląstelinį pernešimą: keratinocituose LC553 - kampo konformaciją gali atpažinti ląstelės membranoje esantys transportavimo baltymai ir endocitozės būdu patekti į citoplazmą.

LC553 patekimas į gleivines, pvz., kvėpavimo ir virškinimo traktus, susiduria su gleivių sluoksnio iššūkiais. Gleivės susideda iš mucino, lipidų ir imunoglobulino, sudarančių dinamišką „filtro“ struktūrą, kurios porų dydis yra 10–1000 nm, kuris gali sulaikyti daugiau nei 90% nanodalelių ir peptidinių vaistų.
Gleivių kilmės baltymo vainiko susidarymas dar labiau apsunkina pristatymo procesą.

Kai LC553 nanodalelės liečiasi su gleivėmis, mucinu, imunoglobulinu A (IgA) ir komplemento baltymais, greitai adsorbuojasi ant dalelių paviršiaus, sudarydami "kietą karūną" ir "minkštą karūną". Tarp jų kietą karūnėlę sudaro didelio afiniteto baltymai, kurie formuojasi greitai ir stabiliai; Minkšta karūna sudaryta iš mažo afiniteto baltymų, kuriuos lengva atskirti. Baltymų vainiko sudėtis ir storis tiesiogiai veikia nanodalelių gebėjimą prasiskverbti į gleives.

Kietojo vainiko apsauginis efektas: kietame vainiklyje esantis mucinas gali prisijungti prie LC553 per vandenilinį ryšį ir hidrofobines sąveikas, sudarydamas stabilų kompleksą, kuris neleidžia jam sąveikauti su tikslinėmis ląstelėmis;
Dinaminis minkšto vainiko reguliavimas: IgA ir komplemento baltymai minkštame vainikelyje gali išskirti LC553 fermentinės hidrolizės ar konformacinių pokyčių metu, atkurdami jo aktyvumą.

Eksperimentai parodė, kad nemodifikuotų LC553 nanodalelių difuzijos koeficientas gleivėse yra tik 0,1 × 10⁻⁷ cm ²/s, o nanodalelių, iš anksto padengtų mucinu, difuzijos koeficientas gali būti padidintas iki 1,2 × 10⁻⁷ cm ²/s, o tai rodo, kad baltymo dinaminės eilės prasiskverbimo reguliavimas. kliūtis.

Net jei LC553 sėkmingai prasiskverbia per odos ar gleivinės barjerą, jis vis tiek turi įveikti tarpląstelinio pristatymo barjerus. Endocitinis lizosomų kelias yra pagrindinis būdas ląstelėms pasisavinti egzogenines medžiagas, tačiau rūgštinė aplinka (pH 4,5-5,0) ir šio kelio fermentinė hidrolizė gali žymiai suardyti LC553. Tyrimai parodė, kad LC553 pusinės eliminacijos laikas endosomose yra tik 15 minučių, o lizosomose jis sutrumpėja iki 5 minučių. Norint pagerinti pristatymo efektyvumą, būtina pasiekti endocitinį pabėgimą taikant šias strategijas:

PH jautrus nešiklis: nanodalelės, paruoštos naudojant polietilenglikolio polipieno rūgšties hidroksiacto rūgšties kopolimerą (PEG-PLGA), gali disocijuoti rūgščioje endosomų aplinkoje, išskirdamosSNAP 8 injekcija;
Membranos suliejimo peptido modifikavimas: kovalentinis HA2 peptido (gaunamo iš gripo viruso) susiejimas su LC553 gali paskatinti nanodalelių susiliejimą su endocitinėmis membranomis ir pasiekti turinio išsiskyrimą; Į ląsteles prasiskverbiantys peptidai (CPP) Padeda: TAT peptido susiliejimas su LC membrana, padidina jo trans-5 membranos gebėjimą (iš ŽIV-513). ląstelių pasisavinimo greitis tris kartus.

SNAP 8 injekcija(Acetyl Octapeptide-3 Injection) yra naujas polipeptidinis anti-senėjimo produktas ir atnaujinta klasikinio anti-senėjimo ingrediento argirelino (acetilheksapeptido-8) versija. Į peptidų seką įtraukus dvi aminorūgštis, jos senėjimą stabdantis aktyvumas labai sustiprėja. Jis plačiai taikomas ir pasižymi nepaprastu efektyvumu stabdant veido senėjimą ir gerinant odos tekstūrą. Pasižymi švelniu poveikiu, dideliu saugumu ir be akivaizdaus atsigavimo laikotarpio, jis tapo populiaria minimaliai invazine anti-senėjimo terapija. Jos pagrindinis mechanizmas yra imituoti SNAP-25 baltymo N-galinį fragmentą, konkurenciškai slopinti SNARE komplekso susidarymą ir sumažinti neurotransmiterio acetilcholino išsiskyrimą.

Tai atpalaiduoja per{0}}sutrauktus veido raumenis, iš esmės pagerina dinamines raukšles ir tuo pat metu reguliuoja odos tekstūrą, kad būtų pasiektas dvigubas senėjimą stabdantis ir odos atjauninimas.

Kalbant apie veido anti-senėjimą, produktas daugiausia skirtas dinamiškoms raukšlėms, įskaitant kaktos linijas, glabellines linijas, varna pėdas ir nosies-labso raukšles, kurias sukelia dažnos veido išraiškos. Klinikiniai tyrimai rodo, kad jis gali sumažinti raukšlių gylį iki 63 % dėl natūralių ir ne{3}}standžių raiškų rezultatų, dažnai išvengiant indukcinio nutukimo. injekcija.

Greitai atpalaiduoja įtemptus veido raumenis po injekcijos ir sumažina dinaminių raukšlių susidarymą. Tuo tarpu skatina kolageno sintezę dermos sluoksnyje, didina odos elastingumą ir palaipsniui išblukina susidariusias statines raukšles. Reguliarus ilgalaikis švirkštimas gali sulėtinti raukšlių gilėjimą ir išlaikyti jaunatvišką veido būklę. Siekiant pagerinti odos tekstūrą, produktas reguliuoja odos medžiagų apykaitą, pašalina šiurkštumą, blankumą ir išsiplėtusias poras, palaiko odos riebalų{4}}vandens balansą ir stiprina odos vandens{5}}užrakinimo galimybes, todėl oda tampa švelni ir skaisti. Jo švelni sudėtis yra draugiška jautriai odai ir nesukelia akivaizdaus dirginimo po injekcijos.

Jis taip pat atkuria odos barjerą ir sumažina išorinės aplinkos daromą žalą odai, ypač tinka žmonėms, kurių odos būklė bloga dėl vėlyvų nakties ir ultravioletinių spindulių. Be to, jį galima derinti su mezoterapija, radijo dažniu ir kitais estetiniais projektais, siekiant dar labiau optimizuoti senėjimą stabdantį -veiksmingumą ir pasiekti dvejopą tikslą – raukšlių išblukimą ir odos atjauninimą. Po injekcijos nereikia ilgo atsigavimo laikotarpio, jis neturi įtakos kasdieniam gyvenimui ir darbui, puikiai atitinka šiuolaikinių žmonių senėjimo -saugumą. Įprasta injekcijos dozė yra 0,33–1 mg vienoje vietoje, koreguojama atsižvelgiant į veido raukšlių būklę. Gydymo kursą sudaro 1–2 injekcijos per savaitę 12 savaičių, užtikrinančios stabilų senėjimą stabdantį ir odą rafinuojantį poveikį.

Preparato farmakokinetika apima keturis pagrindinius procesus: absorbciją, pasiskirstymą, metabolizmą ir išskyrimą. Kaip oktapeptidinis junginys, turintis didelę molekulinę masę (~ 1075, 16 Da) ir stiprų hidrofiliškumą, jis pasižymi tipiškomis polipeptidinių vaistų in vivo savybėmis. Nors dabartiniai tyrimai dažniausiai daromi iš analogiškų polipeptidų, kartu su klinikinio taikymo duomenimis, pagrindinės jų farmakokinetinės savybės buvo išaiškintos, o tai suteikia pagrindą racionaliam klinikiniam skyrimui.

Absorbcija: Produktas suleidžiamas poodine mikroinjekcija į paviršinį poodinį audinį aplink tikslinius veido raumenis. Jį gali greitai absorbuoti vietiniai audiniai, kurių biologinis prieinamumas yra didesnis nei vietinių preparatų.

Veiksminga vietinė koncentracija audiniuose pasiekiama per 1–2 valandas po injekcijos, o didžiausia koncentracija plazmoje atsiranda po 4–6 valandų. Absorbcijos greitis teigiamai koreliuoja su injekcijos doze: maža dozė (50 ug / vietoje) pasižymi švelniu absorbcija, o didelė dozė (100 ug / vietoje) turi šiek tiek greitesnį absorbcijos greitį, be staigių koncentracijos plazmoje šuolių, užtikrinant aukštą saugumą. Dėl didelės molekulinės masės jis negali lengvai prasiskverbti į nepažeistą raginį sluoksnį, todėl poodinė mikroinjekcija yra pagrindinis veiksmingas vartojimo būdas, siekiant išvengti nepakankamos vietinio vartojimo absorbcijos.

Paskirstymas: Po injekcijos LC553 daugiausia pasiskirsto odos audiniuose ir raumenyse aplink injekcijos vietą, ribotas sisteminis pasiskirstymas ir mažas pasiskirstymo tūris. Jis sunkiai prasiskverbia per kraujo-smegenų ir placentos barjerą, be akivaizdaus sisteminio kaupimosi.

Metabolizmas: Jį daugiausia skaido peptidazės ir proteazės vietiniuose audiniuose, vykstant greitam medžiagų apykaitos procesui. Pagrindiniai metabolitai yra aminorūgščių fragmentai, kuriuos organizmas gali toliau absorbuoti ir panaudoti nesudarydamas toksiškų metabolitų.

Jo N-galo acetilinimo modifikacija leidžia tam tikru mastu atsispirti aminopeptidazės skaidymui ir pailgina vietinio veikimo laiką. Bendras jo pusinės -skilimo laikas svyruoja nuo kelių minučių iki kelių valandų, tai atitinka panašius polipeptidinius vaistus, todėl norint išlaikyti veiksmingumą, reikia reguliariai pakartotinai švirkšti.

Išskyrimas: Metabolizmo metu susidarančių aminorūgščių fragmentai daugiausia išsiskiria per inkstus su šlapimu, nedidelis kiekis pašalinamas su tulžimi į žarnyno traktą. Akivaizdžių išskyrimo sutrikimų nepastebėta. Žmonėms, kurių inkstų funkcija normali, dozės koreguoti nereikia, o kaupimosi in vivo įrodymų nėra. Ilgalaikė-įprasta injekcija nepadidins išskyrimo naštos.